5301星形細胞培養基是一種專門用于星形膠質細胞培養的無菌、液體培養基,通常包含基礎培養基、胎牛血清、生長因子、抗生素等成分。
5301星形細胞培養基使用規范:
1.細胞接種
細胞密度:星形細胞接種密度根據細胞代次和狀態調整。
預處理:接種前用培養基預潤培養瓶/皿,避免細胞干燥損傷。
2.培養條件
溫度:37℃恒溫培養。
氣體環境:5%CO2(維持pH穩定),部分星形細胞可能需要低氧條件。
換液頻率:每2-3天更換新鮮培養基,避免代謝產物積累導致細胞毒性。
3.傳代與凍存
消化方法:用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液輕柔消化,血清終止消化。
凍存:使用含10%DMSO的凍存培養基,程序降溫后轉入-80℃或液氮保存。
5301星形細胞培養基注意事項:
1.避免污染
操作前紫外線消毒超凈工作臺30分鐘,佩戴手套和口罩。
開封的培養基需在1個月內用完,避免反復凍融(可分裝為單次用量)。
2.血清質量控制
胎牛血清需經過檢測(如支原體、病毒、內毒素),熱滅活可滅活補體成分。
不同批次血清可能影響細胞狀態,建議批量采購并測試。
3.生長因子保存
bFGF/EGF需分裝為小劑量,-20℃保存,避免反復凍融失效。
4.特殊需求調整
原代細胞培養:可能需要添加更高濃度血清或基質包被。
分化誘導:去除生長因子并添加低血清可誘導星形細胞分化。
